|
能够通过逆转录将 RNA 转化为 DNA,并将双链 DNA 插入宿主细胞基因组。这些过程分别由逆转录酶和整合酶控制,病毒本身将蛋白质与遗传信息一起带入宿主细胞。可以利用病毒的这些特性来允许病毒颗粒掺入和转移外来蛋白质,包括基因组修饰酶、进入暴露于蛋白质工程病毒颗粒的细胞核中。通过将目的外源蛋白融合到 Gag 和 GagPol 蛋白的 N 端,我们发现这些蛋白被整合到病毒颗粒中,在病毒粒子成熟
过程中以蛋白酶依赖性方式从病毒多肽中释放出来,并在Telegram 用户号码列表细的过程(见图 1)。 10示意性表示)[ 163 ]。在之前的工作中,我们展示了 PiggyBac DNA 转座酶、锌指核酸酶和 TAL 效应核酸酶在慢病毒衍生颗粒中包装并运输至细胞的转移和功能性[ 162、163、164、165 ]。此外,Cas9 蛋白的慢病毒递送诱导表达 sgRNA 的细胞中靶向插入缺失的形成[ 166],表明可以进一步优化慢病毒递送以促进由Cas9和sgRNA组成的核
糖核蛋白复合物的转移。在早期的工作中,我们展示了用“一体式”慢病毒颗粒处理的细胞中的基因校正,该慢病毒颗粒携带位点靶向核酸内切酶和含有修复模板的载体RNA,用于逆转录时的同源重组[162 ]。由于这种提供基因组编辑工具包的方法仍处于起步阶段,仍然缺乏体内适用性的证据,但使用不同的假型进行细胞靶向基因组编辑并提供更复杂的编辑技术(例如R
|
|